一、液相色譜柱的清洗簡介：迄今為止，反相色譜法是高效液相色譜法中使用最廣泛的技術(shù)，主要是因?yàn)樗m用于分析大多數(shù)非極性物質(zhì)以及許多可電離和離子化的化合物，使用反相方法時，必須考慮可能的基質(zhì)相互作用，當(dāng)色譜柱被污染時，其色譜行為將與未污染的色譜柱略有不同，污染的色譜柱會產(chǎn)生反壓問題。
必須清潔并重建被污染的反相色譜柱，以恢復(fù)原始操作條件，通常，樣本中包含分析師不感興趣的內(nèi)容，鹽，脂質(zhì)，含脂質(zhì)的物質(zhì)，腐殖酸，疏水性蛋白質(zhì)和其他生物物質(zhì)是一些在使用過程中可能與HPLC色譜柱相互作用的物質(zhì)，這些物質(zhì)的保留值小于或等于分析人員的目標(biāo)。
二、液相色譜柱的清洗所需材料及試劑：
甲醇、氯乙烷、四氫呋喃
三、液相色譜柱的清洗步驟
再生受污染的HPLC色譜柱的關(guān)鍵是了解污染物的性質(zhì)并找到合適的溶劑進(jìn)行去除。如果在重復(fù)進(jìn)樣過程中由于強(qiáng)保留物質(zhì)的積累引起污染，則使用簡單的步驟去除這些污染物通?？梢曰謴?fù)其色譜行為。有時，在多次操作后，會用90％到100％的溶劑B（雙溶劑反相系統(tǒng)中的較強(qiáng)溶劑）沖洗色譜柱，以沖洗20體積以除去污染物。
例如，塔中剩余的脂質(zhì)可與非水溶劑（如甲醇，氯乙烷和四氫呋喃）一起使用。
四、液相色譜柱的清洗注意事項(xiàng)：
如果使用緩沖液系統(tǒng)，請勿直接切換到強(qiáng)溶劑，突然切換到高濃度有機(jī)溶劑可能會使HPLC流動系統(tǒng)中的緩沖液沉淀，這可能引起更大的問題，例如柱頭堵塞，管道堵塞和泵堵塞，泄漏，活塞損壞或噴射閥軸故障，應(yīng)首先使用無緩沖流動相（即，將緩沖液更改為水），沖洗5至10體積后，更換強(qiáng)溶劑。
