熒光素鉀鹽使用說明:
D-熒光素鉀鹽（K+）設(shè)計用于體外和體內(nèi)生物發(fā)光測定。D-熒光素鉀鹽一般為黃綠色，激發(fā)波長為494nm，發(fā)射波長為521nm。D-熒光素的質(zhì)量和純度對于獲得良好和可重復(fù)的結(jié)果至關(guān)重要。
二、D-熒光素鉀鹽的使用方法:
1. 溶液的制備
D-熒光素鉀鹽的溶液可以用于染色、標(biāo)記、檢測等多種應(yīng)用。
制備D-熒光素鉀鹽溶液的方法：
a.首先稱取適量的D-熒光素鉀鹽，加入適量的去離子水中后進行均勻攪拌；
b.使用過濾膜將溶液過濾，除菌。
c.將D-熒光素鉀鹽溶液調(diào)節(jié)至所需要的濃度。
2. 染色實驗過程
D-熒光素鉀鹽可以用于細胞染色、組織染色等染色實驗，實驗方法如下：
a.首先將細胞或組織樣本固定在載玻片上。
b.然后加入適量的D-熒光素鉀鹽溶液，使試劑溶液可以覆蓋樣本。
c.在黑暗條件下可以孵育一段時間，使D-熒光素鉀鹽充分滲透入細胞或組織中。
d.使用PBS緩沖液洗滌樣本，去除多余的D-熒光素鉀鹽。
e.在顯微鏡下觀察樣本，觀察樣品的熒光信號。
3. 實驗標(biāo)記
D-熒光素鉀鹽也可以用于標(biāo)記蛋白質(zhì)、核酸等生物分子。
實驗標(biāo)記方法：
a.首先將蛋白質(zhì)或核酸與d-熒光素鉀鹽共同孵育。
b.再用凝膠電泳等方法分離標(biāo)記后的生物分子。
c.最后在熒光顯微鏡下觀察標(biāo)記后的生物分子即可。
4. 檢測方法
D-熒光素鉀鹽可用于檢測生物分子的存在和濃度。
D-熒光素鉀鹽檢測方法：
a.將d-熒光素鉀鹽與待檢測的生物分子進行共同孵育。
b.用凝膠電泳等方法分離孵育后的混合物。
c.在熒光顯微鏡下觀察熒光信號，即可判斷生物分子的存在和濃度。
1.說明
1.1.簡介及特點
D-熒光素，鉀鹽是一種合成螢火蟲熒光素。這種高純度、無內(nèi)毒素的產(chǎn)品
非常適合體外和體內(nèi)生物發(fā)光測定。高質(zhì)量的基板消除了可能由于內(nèi)毒素的存在而干擾測定。中性條件下的正確包裝確保了產(chǎn)品的完整性和穩(wěn)定性。這種螢光素酶的水溶性基質(zhì)是現(xiàn)成的，易于使用。
主要特點有：
?高純度>99.5%
?溶解性好，靈敏度高
?用于生物發(fā)光測定的可靠體內(nèi)報告基因
?不含內(nèi)毒素（非常適合體內(nèi)應(yīng)用）
?適用于體外實驗
?易于使用
?在整個動物體內(nèi)快速和更容易分布
-熒光素，鉀鹽：
?化學(xué)名稱：4,5-二氫-2-（6-羥基-2-苯并噻唑基）-4-噻唑羧酸鉀鹽
?分子式：C11H7N2O3S2K
?分子量：318.42 g/mol
?CAS編號：115144-35-9
?分子生物學(xué)等級和高級純度：99.7%純度。通過九個獨立標(biāo)準驗證質(zhì)量包括HPLC和FTIR。
1.2穩(wěn)定性和儲存
※ D-熒光素對光、氧氣和水分敏感，呈粉末狀和溶液狀。
※ 儲存（粉末）收到并長期使用后，將粉末儲存在密閉的干燥容器，-20°C。D-熒光素在-20℃下至少穩(wěn)定一年干燥和中性氣體條件。
※ 如果裝有D-熒光素粉末的瓶子必須反復(fù)打開和關(guān)閉，建議用惰性物質(zhì)填充小瓶氣體（氬氣或氮氣）。
※ 儲存（溶液）D-熒光素儲備溶液可以在水中或D-PBS中制備，然后在-20°C下冷凍或優(yōu)選在-80°C下。D-熒光素溶液的穩(wěn)定性是相當(dāng)有爭議的
※ 解決方案:盡管存在以上問題，冷凍的D-熒光素溶液（-80°C）仍然適合使用，D-熒光素是在低pH（＜6.5）和高pH（＞7.5）下相當(dāng)不穩(wěn)定。為了避免重復(fù)的冷凍和解凍循環(huán)，我們建議用小管等分D-Luciferin溶液，并將其儲存在-80°C下。
2.應(yīng)用
※ 活細胞、組織和動物模型中的生物發(fā)光測定
※ 螢光素酶報告基因測定
※ 全動物成像（體內(nèi)和體外基因測定）
※ 熒光素酶基因實驗
※ ATP測定（螢光素酶催化ATP轉(zhuǎn)化為AMP）和免疫測定
※ 焦磷酸測序
※用于序列基因分析實驗
