高效液相色譜法測(cè)定甲硝唑含量
甲硝唑是一種常用的抗生素，用于治療由厭氧菌引起的感染。高效液相色譜法（HPLC）是一種用于分離和分析極性和非極性化合物的色譜技術(shù)，具有快速、靈敏、準(zhǔn)確的特點(diǎn)。內(nèi)標(biāo)法是一種常用的定量分析方法，通過在樣品中加入內(nèi)標(biāo)物質(zhì)，根據(jù)內(nèi)標(biāo)物與待測(cè)物質(zhì)的峰面積比計(jì)算待測(cè)物質(zhì)的含量。
實(shí)驗(yàn)試劑
| 品名 | CAS |
| 土霉素Oxytetracycline | 79-57-2 |
| 甲硝唑Metronidazole | 443-48-1 |
| 甲醇Methanol | 67-56-1 |
實(shí)驗(yàn)步驟
1、色譜條件的選擇
????1)波長的選擇：選擇甲硝唑的最大吸收波長作為測(cè)定波長。
????2)流動(dòng)相的選擇：使用甲醇-草酸水溶液（0.002mol?L?1）作為流動(dòng)相。
2、內(nèi)標(biāo)物溶液的配制
????準(zhǔn)確稱取土霉素，制成100mg?L?1的內(nèi)標(biāo)物溶液。
3、對(duì)照品溶液的制備
????準(zhǔn)確稱取甲硝唑，制成100mg?L?1的對(duì)照溶液。
4、樣品溶液的制備
????取甲硝唑片研細(xì)，準(zhǔn)確稱取適量，制成供試品溶液。
5、甲硝唑和土霉素純物質(zhì)保留時(shí)間測(cè)定
????記錄內(nèi)標(biāo)物和對(duì)照品的保留時(shí)間。
6、校正因子的測(cè)定
????混合內(nèi)標(biāo)物和對(duì)照品溶液，計(jì)算相對(duì)校正因子。
7、樣品的測(cè)定
????混合樣品溶液和內(nèi)標(biāo)物溶液，進(jìn)樣分析。
實(shí)驗(yàn)小貼士:
用內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行定量分析時(shí)，內(nèi)標(biāo)物的選擇應(yīng)符合什么要求？
????內(nèi)標(biāo)物的選擇應(yīng)符合以下要求：與樣品中的待測(cè)物質(zhì)在色譜條件下的分離度良好；與待測(cè)物質(zhì)在化學(xué)性質(zhì)上相似；不與待測(cè)物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)；內(nèi)標(biāo)物在樣品中的添加量與待測(cè)物質(zhì)的量比適當(dāng)。
