LB培養(yǎng)基,是微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中最常用的培養(yǎng)基,用于培養(yǎng)細(xì)菌等細(xì)菌,其分為液相LB培養(yǎng)基,瓊脂制成的固態(tài)LB培養(yǎng)基。加入抗生素的LB培養(yǎng)基可用于篩選以抗生素為主機(jī)的克隆。
一般LB培養(yǎng)基的名稱被廣泛稱之為Luria-Bertani 培養(yǎng)基,根據(jù)該培養(yǎng)基的發(fā)明人貝爾塔尼(Giuseppe Bertani)的解釋,這個(gè)名字來源于英語(yǔ)的 lysogeny broth,即溶菌肉湯。
LB培養(yǎng)基的主要成分:
序列 | 成分 | 用量 |
1 | 胰蛋白胨(tryptone) | 10g |
2 | 酵母提取物(yeast extract) | 5g |
3 | 氯化鈉(NaCl) | 10g |
4 | 瓊脂粉 灰分ash ≤1.5%,Low gel strength(900-1000) | 15-20g |
5 | 瓊脂粉 灰分ash ≤1.5%,Low gel strength(1200-1400) |
備注:加雙蒸水至1000mL, 用5mol/L NaOH(約0.2ml)調(diào)pH至7.2,121℃滅菌30min
LB培養(yǎng)基的配制方法:
?。?)稱量:分別稱取所需量的胰化蛋白胨、酵母提取物和NaCl,置于燒杯中。
?。?)溶化:加入所需水量2/3的蒸餾水于燒杯中,用玻棒攪拌,使藥品全部溶化。
?。?)調(diào)節(jié)pH:用1mol/L NaOH溶液調(diào)pH至7.2。
?。?)定容:將溶液倒入量筒中,加水至所需體積。
?。?)加瓊脂:加入所需量瓊脂,加熱融化,補(bǔ)足失水。
?。?)分裝、加塞、包扎。
?。?)高壓蒸汽滅菌100Pa滅菌約20min。